正交位点特异重组酶位点用于哺乳动物细胞中表征蛋白质变体功能

基因条件性敲除的Flox小鼠，一般在需要切除的DNA片段两侧带有同方向的两个Lox位点（lox-GENE-lox）。与细胞类型特异性Cre小鼠交配后，Cre重组酶识别Lox位点，导致靶基因被敲除。3. 更精准的诱导型Cre-lox系统 为了更准确地进行遗传功能研究，时间特异性的Cre-lox（也叫诱导型Cre-lox）被开发出来，可用于...

在mRNA药物递送载体验证中，Cre-loxP系统的妙用体现在实现对特定组织和细胞类型的高效转染。mRNA疗法在治疗需要细胞内蛋白表达的疾病和用于基因组编辑系统方面展现出希望，但其递送挑战在于保护mRNA不被核酸酶降解，并实现有效细胞摄取、细胞内释放和翻译为蛋白质。当前，脂质和聚合物纳米颗粒等载体已被用于...

胸腺肽是胸腺产生的一种蛋白质和多肽激素,能刺激T淋巴细胞的成熟,平衡和调节免疫功能,是一种与机体的细胞免疫有密切关系的激素。人到成年后,胸腺逐渐萎缩,胸腺素分泌急剧减少或缺失,此时为提高免疫功能减弱的机体,补充胸腺素是所必须的。 免疫系统 参考资料: 胸腺 1.胸腺的结构 胸腺在胚胎早期由鳃沟外胚层和...

后者可被负责碱基错配对的蛋白如 原核细胞 内的MutS 或 真核生物 细胞内的MSH2-3等蛋白质“编辑”。同源重组可以双向交换DNA分子，也可以单向转移DNA分子，后者又被称为 基因转换 （Gene Conversion)。由于同源重组严格依赖分子之间的同源性，因此，原核生物的同源重组通常发生在DNA复制过程中，而真核...

Jeff Smith博士强调，ARCUS成为治疗线粒体疾病优雅而简单的工具，是因为其作为单组分蛋白质，能识别并清除突变的线粒体DNA。新发表的研究论文进一步证明了ARCUS能够克服基于CRISPR的基因编辑技术的局限性，以高特异性消除突变的线粒体DNA，从而改善整体线粒体功能。研究数据还展示了设计ARCUS核酸酶的能力，...

该系统首先发现与P1噬菌体中，被广泛应用于哺乳动物的基因操作。Cre重组酶可以特异性识别34 bp的loxP序列，介导loxP位点之间的基因重组。Cre介导的loxP位点之间的基因重组具有方向性。当两个loxP位点位于一条DNA链上，且方向相同，Cre能有效切除两个loxP位点间的序列；两个loxP位点方向相反，Cre则导致两个...

以上gateway recombination只是开胃小菜,gateway主要用于体外构建载体,而 RMCE则可在体内达成元件转换 的作用。上一节我们了解到元件置换的基本原理就是:需要特点 识别位点+特定的重组酶 。活细胞及生物体内用到的位点特异性重组系统就是大名鼎鼎的 Cre-loxP、Flp-FRT以及Dre-rox 。以Cre-loxP系统为例: 看到上面的图...