生物科研实战——Western blot

可以。westernblot样品煮蛋白后结块是经常会有现象。说明蛋白样品浓度过高已经超出了SDS可以结合的浓度。建议降低样品的浓度即可。WesternBlot中文一般称为蛋白质印迹。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。

揭示SDS-PAGE凝胶制备的秘密武器：五年经验精粹 在科研之路上，Western blot的基石——SDS-PAGE凝胶制备，不容忽视。下面，我将分享五年来的实战心得，助您轻松驾驭这一技术。精心准备，从细节出发：确保玻璃板梳子的洁净无误，用自来水和洗洁精双重清洗，再用尖锐工具仔细刮除残留，最后37度烘干或吹干，...

而western blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素膜NC膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与...

一抗孵育过夜 操作方法：下班时间——孵育一抗——放置在4℃冰箱内——第二天上班拿来孵育二抗 时间8~10个小时，都行，

每次5 min。（10） ECL显影，曝光。Western Blot结果分析 一抗以及二抗稀释比例：编号抗体名称稀释比例二抗名称稀释比例 1His1：1000羊抗兔1：5000 图3 蛋白Western Blot鉴定分析 Fig.3 Western Blot analysis of fusion protein purification M: 蛋白质分子质量标准 1: 纯化后样品 钟鼎生物官网 ...

相同的是 他们都是分子杂交 不同的是 dna的杂交技术——southern印迹杂交 rna的杂交技术——northern印迹杂交 蛋白质的杂交技术——western印迹杂交

WESTERNBLOT还好，里面接触的有毒物质不是很多，可能就是跑电泳的时候得聚变稀酰胺，有点神经毒吧

可能因素 1胶质量'可能不均匀， 2样品自身因素，比如有过多杂质 3电压过大也有影响 我知道对 Sds page有影响

所有的生物实验都要至少3次生物学平行实验以及技术重复