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poly(A)
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单分体基因组,RNA的5’端为VPg,3’端为Poly(A)。基因组编码一个长的多聚蛋白,随后切割产生8~10个产物,包括外壳蛋白(在多聚蛋白C端)。马铃薯Y病毒的基因组长9700nt,编码的多聚蛋白切割产生10个蛋白,分别为:32.4kDa的P1蛋白(功能未知),51.9kDa的HC-Pro蛋白(即辅助
多聚腺嘌呤核糖核苷酸 就是很多个A连在一起组成的RNA啦 原核生物信使RNA的尾部就是POLY A 转录
4 CPSF开始游离,而PAP会继续多聚腺苷酸化及编写约50-250个核苷(视乎生物的品种)的腺苷尾。PABPN1会成为一种分子尺,界定多聚腺苷酸化何时停止。5 PAP离开mRNA,而PABPN1继续维持结合状态。mRNA因此反转录后得到的cDNA都有poly A,因此可以根据这个特性进行race反应。
5'端“帽子”结构的功能 (1)稳定mRNA的一级结构,防止mRNA被5'-核酸外切酶所水解;(2)为mRNA识别核糖体提供信号,使mRNA较快地与核糖体结合,以提高mRNA对蛋白质的合成效率。3'端polyA尾巴结构的功能 (1)有助于mRNA从细胞核向细胞质转移;(2)对蛋白质的合成速度有影响;(3)与保护mRNA的...
在构建cDNA文库的过程中,一种常用的方法是oligo(dT)引导的DNA合成:oligo(dT)引导策略: 利用真核mRNA分子尾端普遍存在的poly(A)序列,通过添加含有12-20个脱氧胸腺嘧啶核苷酸的oligo(dT)短片段,反转录酶能够启动cDNA的第一链合成。然而,这种方法存在局限性:由于反转录酶只能从mRNA分子的3'末端开始...
(1)前tRNA 3'端的U由CCA取代;(2)嘌呤碱或核糖C2'的甲基化;(3)尿苷被还原成双氢尿苷(DH)或核苷内的转位反应,成为假尿嘧啶核苷(Tψ);(4)某些腺苷酸脱氨成为次黄嘌呤核苷酸(AMP→IMP)。mRNA转录后的加工包括:(1)5'端加帽;(2)3'端加poly A;(3)内含子的剪接;(4)RNA的编辑等。
②核酸:核酸含量占病毒粒子的4.5%,一般由4~5条RNA构成,依据大小分别称为RNA1~5(RNA1,6746nt;RNA2,4612nt;RNA3,1774nt;RNA4,1467nt;RNA5,1358nt),我国内蒙古分离物的多数基因序列也已经获得。所有RNA的5′端都有帽子结构,3′端具有Poly(A)尾。5条RNA同源序列仅局限于5′端的...
(2)真核生物RNA的降解 根据靶mRNA的性质,可以将真核细胞的mRNA降解途径分为以下两类:①正常转录物降解 正常转录物是指细胞产生的有正常功能的mRNA。是胞内大部分mRNA降解的途径。降解机制:首先结合蛋白PABP脱离poly(A)尾,然后由脱帽酶启动脱帽反应,切除mRNA5′端的帽结构。脱帽后的mRNA被5′→3...
一、QPCR原理 QPCR原理基于PCR技术的扩增过程,通过加入荧光化学物质来实时检测每次PCR循环后的产物总量。这种方法能够精确测量DNA或RNA的扩增程度,从而实现对基因表达的定量分析。检测方法:加尾法:该方法通过向miRNA的3'端添加一段多聚尾巴(如poly(A)尾巴),然后使用带有与尾巴互补序列的引物进行反转录...
在原核生物中,顺反子的概念略有不同,通常指的是一个操纵子中的多个基因共同转录产生的单个mRNA分子,这种mRNA称为多顺反子mRNA。原核生物的mRNA缺乏帽子结构和poly-A尾巴,其5'端通常有一段称为SD序列的保守序列,它有助于起始tRNA与mRNA的结合,从而开始蛋白质合成。原核生物mRNA的编码区通常编码...