zeocin

酵母单杂涂板后36小时能长出来。根据查询相关资料信息显示，将大肠杆菌划线与含zeocin的LB平板，36小时就长出来了很微小的菌落。

采用PCR方法从水稻细菌性条斑病菌RS105菌株中扩增harpinXooc编码基因hrf2,将其克隆到酵母表达载体pPICZαA的分泌信号肽基因下游,获得重组表达质粒pPICZαA-hrf2。重组表达质粒线性化后电击转化至毕赤酵母宿主菌X-33,经抗生素Zeocin筛选和PCR鉴定后,得到重组酵母菌X-33/pPICZαA-hrf2。用甲醇诱导重组酵母...

取全部均匀涂布于含 Zeocin 25 ug/ml 的LLB-Zeocin平板上，正放，待涂布液不在流动，37℃ 培养12～16小时。(2)线性化质粒DNA对Pichia pastorisGS115的转化 取新鲜制备的(或-70℃冻存的)感受态细胞置于冰浴中，使其完全解冻;1)将100μl菌体移出至一新的无菌Eppendorf管中，加入5-20μg线性化...

加入混匀了的病毒转染液（950μL培养基+50μL浓缩病毒+1μL 1000×Polybrene），37℃，5% CO2培养箱中培养。12h后，更换回普通培养基。使用Puro（PLKO.1载体）或zeocin（pENTR223.1载体）筛选3~5天，纯化转染成功细胞株。PLL3.7载体转染后，通过流式细胞仪分选GFP+细胞，纯化转染细胞株。

也可以115℃15min灭菌.YPD另外一种配方：2%Trypton(胰化胨或称胰蛋白胨)、2%Dextrose (glucose)（葡萄糖）,若制固体培养基,加入2%琼脂粉,115℃15min灭菌.液体YPD培养基可常温保存；琼脂YPD平板在 4℃可保存几个月.加入Zeocin 100ug/ml,成为YPDZ培养基,可以4℃条件下保存1～2 周.YPEG：除了用3%...

没有影响。

混匀200ul菌液移入电击杯 使用电击穿孔仪进行转化设置电压 2500 V间 5 ms 电击往电击杯加入 800ul SOC培养基冲洗菌体转移至灭菌1.5 ml EP管37℃150 rpm 轻摇45～60 min 取全部均匀涂布于含 Zeocin 25 ug/ml LLB-Zeocin平板放待涂布液流37℃ 培养12～16 ...

葡萄糖可以过滤除菌，也可以115℃15min灭菌。 YPD另外一种配方： 2%Trypton(胰化胨或称胰蛋白胨)、2%Dextrose (glucose)（葡萄糖），若制固体培养基，加入2%琼脂粉，115℃15min灭菌。液体YPD培养基可常温保存；琼脂YPD平板在 4℃可保存几个月。加入Zeocin 100ug/ml，成为YPDZ培养基，可以4℃条件下...

取全部均匀涂布于含 Zeocin 25 ug/ml 的LLB-Zeocin平板上，正放，待涂布液不在流动，37℃ 培养12～16小时。(2)线性化质粒DNA对Pichia pastorisGS115的转化 取新鲜制备的(或-70℃冻存的)感受态细胞置于冰浴中，使其完全解冻;1)将100μl菌体移出至一新的无菌Eppendorf管中，加入5-20μg线性化...