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1.取样,研磨(组织): 迅速取出组织样本,在电子天平中称重约0.3-0.5 g(也可根据实际经验估测取样量),放入液氮预冷的研钵中,边研磨边加液氮,整个过程都不要使组织融化。2.裂解:(1)组织:按每100 mg组织加入1 mL TRIzol,继续研磨至较细粉末,将组织裂解液转移到1.5 mL 离心管中,...
样品体积不应超过TRIzol体积10%。②单层培养细胞直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。③细胞悬液离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母...
如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器 1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水 2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop 3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。4.荧光定量PCR试剂:通常有用...
RNA的提取最经典的也是最靠谱的还是TRIZOL提取 1.1TRIZOL试剂盒提取酵母菌总RNA 按BBI公司提供的TRIZOL试剂使用说明书进行操作:取1ml指数中期的酵母培养液,经计数后(酵母菌每1×108个加1mlTRIZOL)离心收集菌体,加入1mlTRIZOL,混匀,激烈振荡,室温放置5min,加入200μl氯仿,剧烈振荡30s,12000×...
4.3常见的有毒物质的处理:溴化乙锭、Trizol、丙烯酰氨、DEPC、甲酰氨等毒性高、环境危害大的物质,分类收集后统一处理。4.3.1 EB(Ethidiunl bromide,溴化乙锭):EB是一种强烈诱变剂并有中度毒性,应戴手套操作,对于含有EB的溶液也不应直接倒下水道,用后妥善净化处理:EB含量大干0.5μg/ml溶液...
1. 2,4,6-tri-tertbutylphenol (2,4,6-TTBP):一种叔丁基苯酚抗氧剂,其CAS号为732-26-3。新增因素包括生殖毒性、PBT和vPvB,表示其可能对人类健康和环境造成严重影响。常见用途包括工业燃料添加剂、混匀剂、工业生产间体等。2. Bumetrizole:紫外吸收剂UV-326,CAS号为3896-11-5。新增因素为...
回答量:5 采纳率:0% 帮助的人:2.6万 我也去答题访问个人页 关注 展开全部 样品的内源RNA酶很丰富,注意RNA酶的降解,trziol量充分。。trizol的成分可以抑制RNA酶活性。对于用得器材,耗材等可以用外源RNA酶清除剂处理掉。 已赞过 已踩过< 你对这个回答的评价是? 评论 收起 其他...
11. DEPC水溶解(30ul,可变),分装,2ul电泳,2ul比色,其余5ul分装至于手套中冻于-20度中 结果仍旧不是很理想,测得的OD260/280=1。所以怀疑有DNA污染:1. 使用TRIZOL再抽提一次 2. 除去DNA的分子克隆书上的方法:1. 材料:TE缓冲液(10mmol/lTris.HCL,PH7.4,1mmol/lEDTA,ph8.0 1...
名称:紫外线吸收剂UV-326化学名:2'-(2'-羟基-3'-叔丁基-5'-甲基苯基)-5-氯苯并三唑英文名:Bumetrizole;2-(3-tert-Butyl-2-hydroxy-5-methylphenyl)-5-chloro-2H-benzotriazole;2-(5-Chloro-2H-benzotriazol-2-yl)-6-(1,1-dimethylethyl)-4-methylphenolCAS 号:3896-11-5结构式:...
大鼠颗粒细胞的提取和细胞中RNA的抽提 总RNA提取试剂盒(TRIzol法)RIpure试剂是直接从细胞或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇沉淀来还原。在除去水样层后,样品中的...