为您找到"
质粒和目的基因片段分别双酶切(bamh1,xba1)连接后电转感受态细胞,同时...
"相关结果约100,000,000个
可以直接转化化学感受态细胞Ecoli.DH5a。如果有TOP10，最好用这个，转化大质粒Top10要比DH5a更好。转化时记得要做对照试验。我做过类似的连接转化，试验还挺顺利，两种感受态都可以搞定。
同时做二组对照反应，其中对照组一只有质粒载体无外源DNA；对照组二只有外源DNA片段没有质粒载体。二、 E. coli DH5α感受态细胞的制备及转化 每组连接反应混和物各取2μl转化E. coli DH5α感受态细胞。1、从-70℃冰箱...
但是非要用这个酶切位点的话，就需要用非甲基化的感受态细胞，如JM109或者JM110。4.第四步，看多克隆位点的序列：末端如果有差异的话，可以把基因的ATG（甲硫氨酸）的5`末端替换1-2个碱基（变成GTG或者GCG这样），从第...
1.将快速生长的大肠杆菌置于经低温（0℃）预处理的低渗氯化钙溶液中，便会造成细胞膨胀，同时Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构，促使细胞外膜与内膜间隙中的部分核酸酶解离开来，离开所在区域，诱导细胞成为感受态细胞 ...
研究中常用的双酶切体系就是20ul双酶切体系和10ul双酶切体系，二者除了调配比例之外，所用的酶是相同的，所以反应温度，酶切时间等等都差不多。只有在需要回收用于连接的时候才选取50ul体系的双酶切体系，同时多增加DNA含量...
1>对于微生物生物细胞,一般用钙离子处理法来导入目的基因。钙离子(一般用氯化钙溶液)对微生物细胞的作用是增加细胞壁的通透性。钙离子处理微生物细胞→感受态细胞→将基因表达载体与感受态细胞混合在缓冲液中→一定温度下促使...
故A正确；B、将目的基因导入细菌时，需要用Ca2+处理细菌，使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，故B正确；C、用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞，实质具有抗旱基因，再采用通过植物组织培养技术将受体细胞培养...
同一种酶切的末端可以相连接在一起，如果质粒的左端和目的基因的左端用同一种酶切，二者的右端用另一种相同的酶切，那么就可以实现定向连接了。
图一是对的，原始质粒里面跑在最下面的质粒是超螺旋，中间那条是就是环状质粒，大小和后面你用酶切线性化的差别不大，最上面的可能是基因组DNA的污染
可能是两个载体互连了，你酶切了跑胶分析一下长度就清楚了。原因基本跑不了载体互连、多个片段互连，或者根本没提出来，而是把细菌基因组给弄出来了，这样你就要检查一下提质粒的过程，仔细看一下胶上有没有条带什么的。...